Действующий
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image61.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image62.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image63.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image64.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image65.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image66.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image67.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image68.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image71.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image72.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image73.emf.jpg)
Перед применением раствор выдерживают при комнатной температуре в темном месте не менее 20 мин, но не более 2 ч.
Для построения градуировочного графика готовят серию градуировочных образцов в количестве не менее пяти с массовыми концентрациями антибиотиков в диапазоне от 0,001
до 1
(для левомицетина в диапазоне от 0,00015
до 0,1
) путем разбавления метанолом основных градуировочных растворов антибиотиков, приготовленных по 6.1.6.1.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image75.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image76.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image77.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image78.emf.jpg)
В мерную пробирку вместимостью 10
помещают 10 мг демеклоциклина, взвешенного с точностью до 0,5 мг. Добавляют 5
метанола и помещают в ультразвуковую баню на 1 мин. Объем полученного раствора доводят метанолом до метки.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image79.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image80.emf.jpg)
Массовая концентрация раствора внутреннего стандарта демеклоциклина в растворе составляет 1
(уточненное значение концентрации внутреннего стандарта рассчитывается с учетом содержания основного вещества).
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image81.emf.jpg)
Путем нескольких разбавлений доводят массовую концентрацию раствора внутреннего стандарта демеклоциклина до значения 1
. Раствор с данной концентрацией используют для внесения в исследуемые образцы.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image82.emf.jpg)
Разделение проводят в режиме градиентного элюирования: с 0% до 55% мобильной фазы Б (6.1.4.2) за 25 мин.
6.3.1 Для построения градуировочной зависимости анализируют серию градуировочных образцов, приготовленных по
Пробы продуктов освобождают от упаковки, нагревают до температуры (20
2)°С, аккуратно перемешивают и сразу же проводят измерение.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image87.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image88.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image89.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image90.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image91.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image92.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image93.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image94.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image95.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image96.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image97.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image98.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image99.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image100.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image101.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image102.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image103.emf.jpg)
Затем колбы с раствором помещают в ультразвуковую баню на 15 мин, охлаждают до температуры (20
2)°С. Полученную смесь фильтруют через бумажный фильтр. В случае получения непрозрачного раствора допускается его центрифугирование при скорости вращения 15000 об/мин в течение 5 мин.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image104.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image105.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image106.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image107.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image108.emf.jpg)
В полипропиленовый флакон (виалу) вместимостью 15
помещают (1,000
0,001) г пробы продукта, подготовленной по 6.4.1, или 10,0
пробы продукта, подготовленной по 6.4.8, добавляют 0,1
раствора внутреннего стандарта (6.1.6.3). Затем добавляют 3
ацетонитрила, закрывают крышкой и интенсивно перемешивают на встряхивателе в течение 3 мин. Оставляют на 15 мин в горизонтальном положении. Далее виалу с образцом помещают в центрифугу, предварительно охлажденную до температуры 4°С, и центрифугируют при скорости вращения 4000 об/мин в течение 20 мин.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image109.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image110.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image111.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image112.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image113.emf.jpg)
Полученную водную фракцию переносят в мерную пробирку вместимостью 10
и упаривают до 1
на нагревательном модуле в токе азота под вакуумом при температуре (40
1)°С. К полученному остатку добавляют 3 - 5
буферного раствора (6.1.3), аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят буферным раствором (6.1.3) до метки и помещают в ультразвуковую баню на 1 мин.
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image114.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image115.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image116.emf.jpg)
![](https://dokipedia.ru/sites/default/files/doc_files/535/004/8/files/image117.emf.jpg)