Примечание - Перед нанесением стандартные растворы L-лизина должны быть выдержаны при комнатной температуре не менее 1 ч.

Электрофорез проводят в ацетатном буфере или в растворе буры в течение 30-90 мин при градиенте напряжения 14-35 г/см, причем плотность тока устанавливается в пределах от 0,2 до 0,9 мА/см.

По окончании электрофореза бумагу высушивают сначала в вытяжном шкафу, а затем в сушильном шкафу при температуре (105   2) °С в течение 10 мин. Далее электрофореграмму опрыскивают нингидриновым реактивом, подсушивают в вытяжном шкафу до появления красных пятен, а затем в сушильном шкафу при температуре 60 °С в течение 20 мин или при температуре 80 °С в течение 10 мин.

Пятна, соответствующие лизину, вырезают и экстрагируют 5 см³ элюирующего раствора в течение 15 мин в темноте. Затем замеряют интенсивность окраски раствора на фотоколориметре при зеленом светофильтре в кювете с толщиной поглощающего свет пути 10 мм против контрольного раствора. Для его получения вырезают с края электрофореграммы участок в два раза больший, чем площадь вырезанного пятна лизина, и экстрагируют 10 см³ элюирующего раствора в течение 15 мин в темноте.

5.4.5 Обработка результатов

Массовую долю лизина Х в пересчете на сухое вещество, %, вычисляют по формуле

где - концентрация стандартного раствора L-лизина, равная 2,5 г/дм³;

- навеска образца, г;

0,1 - объем мерной колбы, дм³;

100 - перевод в проценты;

и - среднеарифметические величины оптических плотностей стандартных растворов концентраций 2,5 и 5,0 г/дм³ соответственно;

- среднеарифметическая величина оптической плотности анализируемого раствора;

W - массовая доля влаги, %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 10 % относительных.

5.5 Определение массовой доли золы

5.5.1 Аппаратура и материалы:

- печь муфельная с диапазоном нагрева от 50 °С до 1000 °С, обеспечивающая поддержание заданной температуры в пределах  25 °С;

- весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ Р 53228;

- стаканчики для взвешивания стеклянные (бюксы) типа СН по ГОСТ 25336; или

- металлические диаметром 45-50 мм и высотой 40-50 мм;

- эксикаторы 1-250 по ГОСТ 25336;

- тигли фарфоровые по ГОСТ 9147 или тигли платиновые;

- кальций хлористый 2-водный по [6], прокаленный; или

- кислота серная по ГОСТ 4204, плотностью 1,64 г/см³;

- вазелин или смазка вакуумная.

5.5.2 Подготовка к испытанию

Муфельная печь должна быть снабжена терморегулятором и прибором для определения температуры внутри муфельной печи.

Эксикатор в нижней части должен быть заполнен прокаленным хлористым кальцием или концентрированной серной кислотой. Пришлифованные края эксикатора смазывают вазелином или вакуумной смазкой.

5.5.3 Проведение испытания

Навеску препарата 2,0000-3,0000 г, взвешенную с точностью до 4-го десятичного знака, помещают в предварительно прокаленный до постоянной массы и взвешенный фарфоровый или платиновый тигель, смачивают 0,5-1,0 см³ концентрированной серной кислоты и осторожно нагревают на сетке или песчаной бане до удаления паром серной кислоты. Затем прокаливают при красном калении и температуре 600 °С до постоянной массы в течение 2 ч, избегая сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Последующие взвешивания проводят через 30-40 мин после прокаливания тигля до постоянной массы. Постоянная масса тигля считается достигнутой, если разница в массе между двумя прокаливаниями не будет превышать 0,001 г.

5.5.4 Обработка результатов

Массовую долю золы , %, вычисляют по формуле

где - масса тигля с навеской после сжигания, г;

- масса пустого тигля, г;

- масса тигля с навеской до сжигания, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух параллельных определений. Расхождение между двумя параллельными определениями не должно превышать  0,1 % абсолютных.

5.6 Определение содержания остатка после просеивания на сите N 05

5.6.1 Аппаратура, материалы и реактивы:

- весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228, 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г;

- сито из проволочной сетки N 05 по ГОСТ 3306 или по другой действующей нормативно-технической документации;

- рассев лабораторный любого типа, обеспечивающий 180-200 колебаний в минуту;

- кружочки резиновые массой не более 1 г.

5.6.2 Проведение испытания

Препарат массой 100,00 г взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака, помещают на сито лабораторного рассева, закрывают крышкой, укрепляют на платформе рассева, включают прибор и просеивают в течение 10 мин. Для очистки сита при просеивании применяют резиновые кружочки, которые помещают по 5 шт. на сито. После просеивания кружочки с сита удаляют. Допускается просеивание ручным способом при 110-120 движениях в минуту и размахе колебаний сита 10 см в течение 15 мин. Остаток на сите взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака.

5.6.3 Обработка результатов

Содержание остатка на сите , % вычисляют по формуле