Действующий
Метод основан на способности исследуемого препарата, помещенного в сушильный шкаф, отдавать гигроскопическую влагу при нагревании.
- весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ Р 53228-2008;
Перед испытанием, а затем не реже одного раза в месяц, проверяют правильность показаний температуры в сушильном шкафу в соответствии с инструкцией пользования прибором. Нижняя часть эксикатора должна быть заполнена сухим хлористым кальцием или концентрированной серной кислотой. Пришлифованные края эксикатора смазаны вазелином, притерты.
В предварительно высушенный до постоянной массы бюкс (весовой стаканчик), взвешенный с погрешностью не более 0,001 г, помещают навеску препарата массой 5 г, равномерно распределив ее. Открытый бюкс с навеской и крышкой помещают в сушильный шкаф, предварительно нагретый до (103 2) °С.
Высушивание проводят в течение 3 ч, считая с момента установления в шкафу температуры (103 2) °С. Затем бюкс вынимают из сушильного шкафа тигельными щипцами, быстро закрывают крышкой, ставят в эксикатор на 20-30 мин для охлаждения до комнатной температуры. После охлаждения бюкс с навеской взвешивают. Последующие взвешивания проводят через каждый час высушивания навески. Высушивание проводят до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последующими взвешиваниями не будет превышать 0,005 г.
Вычисления проводят с точностью до 0,01 %. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать 0,5 %.
Действующим началом гриба являются конидии. Учитывая то, что препарат не подвергают сушке и длительному хранению, можно считать, что все образовавшиеся конидии будут жизнеспособными. Поэтому для определения нормы расхода препарата необходимо учитывать содержание (титр) конидий в 1 г зернового влажного препарата.
- весы лабораторные 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ Р 53228-2008;
Приготовление суспензии конидий вертициллина. Из средней пробы препарата отбирают навеску массой 100 г и помещают в фарфоровую ступку. В стакан или колбу отмеряют 1000 см3 воды и понемногу (50-100 см3) вливают в ступку с препаратом, растирают тщательно пестиком и полученную массу переносят на слой марли, расположенной на сите. Остатком воды споровомицедиальную массу отделяют от питательного субстрата. Суспензию после промывки собирают в стакан, она служит исходной суспензией 10-3, из которой готовят два последующих разведения 10-4, 10-5. После перемешивания пипеткой отбирают 1 см3 суспензии и переносят в пробирку с 9 см3 воды.
Из последнего разведения 10-5 пипеткой на 1 см3 переносят по капле суспензии на две площадки камеры Горяева, накрывают покровным стеклом и тщательно притирают его до появления радужных кругов. Через 3-4 мин ведут подсчет конидий под микроскопом при окуляре 15х и объективе 40х при 600-кратном увеличении. Подсчитывают среднее число конидий, приходящихся на один большой 16-клеточный квадрат (13 на одном поле и 13 на другом).