- весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228, 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов;

- стаканы стеклянные по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см³;

- воронки Бюхнера по ГОСТ 9147, вместимостью 120 см³;

- колбы для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336;

- цилиндры 2-25 по ГОСТ 1770;

- бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026, марки ФОБ, ФОС или ФОМ.

6.5.2 Проведение испытания

Препарат массой 1,0000 г взвешивают в стакане с точностью до 4-го десятичного знака, затем приливают 15-25 см³ нагретой до кипения дистиллированной воды. Содержимое стакана хорошо перемешивают. Не прекращая перемешивания, приливают цилиндром 25 см³ раствора с массовой долей сернокислой меди 6 % и 25 см³ раствора с массовой долей гидроокиси натрия 1,25 %. Смесь оставляют на 2-3 ч, чтобы жидкость над осадком стала прозрачной. Жидкость и осадок отфильтровывают через вакуум-фильтр. Осадок на фильтрате промывают водой до тех пор, пока фильтрат не станет бесцветным.

Промытый и подсушенный на воздухе осадок с фильтром переносят в колбу для сжигания. Дальнейшее определение белкового азота ведут по ГОСТ 32044.1.

6.5.3 Обработка результатов

Массовую долю белка Х в пересчете на абсолютно сухое вещество, %, вычисляют по формуле

где - объем раствора гидроокиси натрия концентрации 0,1 моль/дм³ (0,1 н), израсходованный на титрование 50 см³ раствора серной кислоты концентрации 0,05 моль/дм³ (0,1 н) в контрольном опыте, см³;

- объем раствора гидроокиси натрия концентрации 0,1 моль/дм³ (0,1 н), израсходованный на титрование остатка серной кислоты, не связанный с выделившимся аммиаком при его отгонке, см³;

K - поправочный коэффициент к титру раствора гидроокиси натрия концентрации 0,1 моль/дм³ (0,1 н);

0,0014 - количество азота, эквивалентное 1 см³ точного раствора серной кислоты концентрации 0,05 моль/дм³ (0,1 н);

6,25 - коэффициент для пересчета азота на белок;

М - масса навески препарата, г;

W - массовая доля влаги в кормобактерине, %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 1,0 % относительных, а расхождение между результатами, полученными в разных условиях, - 3 % относительных.

6.6 Определение числа микробных клеток

6.6.1 Аппаратура, материалы и реактивы:

- весы лабораторные общего назначения по ГОСТ Р 53228, 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов;

- термостат любого типа, обеспечивающий температуру нагрева (37   0,2) °С;

- лупа с увеличением в 8-10 раз по ГОСТ 25706;

- прибор для счета колоний бактерии (ПСБ) по [5];

- колбы 2-250-2 по ГОСТ 25336;

- пипетки 1,4-2-1 по ГОСТ 29227;

- пробирки лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336, вместимостью 10 см³;

- чашки ЧБН-2 по ГОСТ 25336;

- натрий хлористый по ГОСТ 4233;

- агар микробиологический по ГОСТ 17206 или

- агар пищевой по ГОСТ 16280;

- бульон мясопептонный по ГОСТ 20730;

- вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

- марля бытовая по ГОСТ 11109.

6.6.2 Подготовка к испытанию

Мясопептонный агар готовят по ГОСТ 32901.

6.6.3 Проведение испытания

Препарат массой 1,00 г взвешивают с точностью до 2-го десятичного знака, помещают в колбу с 99 см³ стерильного физиологического раствора, получают разведение 10^-2 и тщательно встряхивают. Из полученной взвеси готовят последующие разведения 10^-3 и 10^-4.

После оседания взвешенных частиц из верхнего слоя жидкости берут суспензию каждого разведения и засевают на 2-3 чашки следующим образом: 1 см³ суспензии, взятой стерильной пипеткой, помещают в центр каждой чашки и заливают около 15 см³ расплавленного и охлажденного до температуры 45 °С мясопептонного агара. При посеве и заливке агаром крышку чашки Петри быстро приоткрывают и закрывают.

Сразу после заливки агара содержимое чашки тщательно перемешивают, делая чашками круговые движения на гладкой поверхности стола для равномерного распределения посевного материала. После застывания агара чашки перевертывают крышками вниз, помещают в термостат и выдерживают в течение 48 ч при температуре (37   0,2) °С.

6.6.4 Обработка результатов

Число выросших колоний подсчитывают в каждой чашке, поместив ее вверх дном (без крышки), пользуясь лупой и прибором для подсчета колоний. Каждую подсчитанную колонию отмечают на дне чашки чернилами. При большом числе колоний и равномерном их распределении дно чашки делят на четыре одинаковых сектора, подсчитывают число колоний в двух-трех секторах, находят среднее арифметическое и умножают на общее число секторов. Таким образом находят общее число колоний, выросших на одной чашке. Для подсчета общего числа микробных клеток в 1,00 г препарата число колоний, выросших на каждой чашке, умножают на соответствующее разведение. Полученные результаты по отдельным чашкам складывают и делят на количество подсчитанных чашек. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

6.7 Метод выявления сальмонелл

6.7.1 Сущность метода

Метод заключается в предварительном обогащении проб в неизбирательной жидкой среде, последующем обогащении на жидкой среде, посеве на твердую селективную среду. После инкубирования среда исследуется на присутствие колоний, подозреваемых на сальмонеллы, и в подтверждение их принадлежности к сальмонеллам.

6.7.2 Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды:

- автоклав электрический или других аналогичных марок;