Действующий
1. Забор клеток пуповинной крови проводится обученным персоналом (врач акушер-гинеколог, акушерка) только после получения письменного информированного согласия матери на использование плацентарного материала (Приложение 2 к настоящему приказу). Перед получением информированного согласия и непосредственно перед забором пуповинной крови проводят отбор потенциальных доноров, исходя из принятых противопоказаний.
2. Противопоказаниями к забору пуповинной крови являются: отсутствие информированного согласия, острые инфекционные заболевания матери на момент родов, носительство ВИЧ, вирусов гепатита В и С, заболеваний, передающихся половым путем, психические заболевания, онкологические заболевания матери, в том числе в стадии ремиссии, применение цитостатических и тератогенных средств, применение внутривенных наркотических средств, наличие в семье носителей ВИЧ, вирусов гепатита В и С, наличие наследственных и врожденных заболеваний в семье, наличие переливаний крови или ее компонентов за последние 12 месяцев, постоянное отстранение от донорства крови, опухоли плаценты, мертворождение, тяжелая асфиксия плода, патология отделения плаценты, задержка начала забора пуповинной крови более 15 минут после отделения плаценты.
3. Пуповинная кровь забирается после пережатия пуповины и отделения ребенка от плаценты. Допускается забор пуповинной крови до отделения плаценты в случае рождения потенциального родственного донора. Взятие пуповинной крови проводится непосредственно в родильном помещении, либо в чистом помещении рядом с родильным залом не позднее, чем в течение 15 минут после рождения ребенка. Взятие крови в более поздний срок не допускается.
4. Забор пуповинной крови осуществляется с соблюдением правил асептики путем пункции пуповинной вены в замкнутые системы для сбора пуповинной крови. В качестве антикоагулянта может применяться ACD или CPD.
5. Хранение и транспортировка пуповинной крови осуществляется при температуре 18 - 25°С не свыше 24 часов.
6. Непосредственно перед выделением стволовых клеток осуществляется контроль количества ядросодержащих клеток в образце пуповинной крови.
7. Перед выделением стволовых клеток проводится взвешивание образца. Образцы с количеством крови менее 60 мл выбраковываются, утилизируются или используются для исследовательских целей по запросам научно-исследовательских учреждений.
8. Перед началом выделения стволовых клеток пуповинной крови производится забор образцов для осуществления определения группы крови, резус-принадлежности, ИФА и ПЦР-диагностики вирусных инфекций, определения бактериальной и грибковой контаминации, HLA-типирования и определения количества СБ34+клеток.
9. Для выделения стволовых клеток осуществляется первичное центрифугирование образцов пуповинной крови в мешках с добавлением раствора гидроксиэтилкрахмала (HES) для получения плазмы, обогащенной лейкоцитами. Проводится сбор плазмы и ее повторное центрифугирование с отделением фракции лейкоцитов, содержащей стволовые клетки. Обедненная плазма удаляется с применением аппарата AutoVolume Expressor. Осуществление выделения стволовых клеток методом центрифугирования в градиенте плотности, а также с применением магнитных микрочастиц осуществляется по запросам лечебных и научно-исследовательских учреждений. Клетки помещаются на 40 минут в холодильник при температуре + 4С.
10. К концентрату клеток добавляется криоконсервирующий раствор (ДМСО + декстран) в количестве 5 мл за 15 минут, содержимое мешка переносится в мешок для замораживания путем выдавливания и запаивается с образованием 3 - 4 изолированных фрагментов соединительной трубки. Проводится запаивание мешка в тефлоновый контейнер, помещение в кассету и установка в "Bioarchive(R)". При помещении образца производится его маркировка с помощью штрих-кода и занесение данных в компьютер. Хранение стволовых клеток осуществляется в жидком азоте при температуре -196°С. Сохранение и транспортировка препаратов клеток в парах жидкого азота допускается только в том случае, если температура не поднимается выше - 150°С.
11. Тестирование образцов пуповинной крови: определение групповой и резус принадлежности, тестирование на наличие ВИЧ, гепатитов В и С, HTLV-1 и 2, ЦМВ, парвовируса В19 методом ИФА, определение ВИЧ и ЦМВ ПЦР-методом, исследование на стерильность, проведение HLA-типирования, определение CD34+ клеток и колониеобразования. В случае обнаружения носительства вирусов (кроме ЦМВ), бактериальной и грибковой контаминации и низкого количества CD34+ клеток образец выбраковывается и может быть использован для исследовательских целей по запросам научно-исследовательских учреждений.
12. Все результаты полученных исследований образцов заносятся в регистрирующий журнал и компьютерную базу данных. Сохранение информации осуществляется бессрочно. Строго указываются причины выбраковки образца.
13. Препараты стволовых клеток пуповинной крови выдаются по индивидуальной в каждом случае письменной заявке лечебного или научно-исследовательского учреждения. Выдача стволовых клеток для применения в лечебных учреждениях допускается только после завершения всего комплекса обследований (за исключением клеток, полученных при рождении родственного донора)
14. Размораживание образцов производится в размораживателях на водяной бане при постоянной температуре 37°С, перед инфузией рекомендовано произвести отмывание клеток от ДМСО.
15. Все работы проводятся с использованием одноразовой пластиковой посуды и расходных материалов с маркировками "Стерильно" или "Апирогенно"
16. Оборудование, расходные материалы, среды, химические реактивы и их компоненты должны быть разрешены к применению Минздравом России.
Информированное согласие
матери (семьи) донора на сбор пуповинной крови для неперсонифицированного хранения
Пуповинная кровь собирается после рождения ребенка и его отделения от плаценты. Сбор ее не связан с каким-либо риском для здоровья ребенка и матери. Полученная пуповинная кровь будет направлена в ГУЗ "Банк стволовых клеток" ДЗМ, где осуществляется тестирование выделенных из пуповинной крови стволовых гемопоэтических клеток и сохранение их в жидком азоте. Клетки используются для родственной и неродственной трансплантации по мере необходимости при совпадении параметров донорских клеток и больного. Использование стволовых клеток осуществляется по правилам безвозмездного донорства крови - отсутствует вознаграждение за донорство клеток, использование их осуществляется по мере потребности лицензированных лечебных учреждений без согласия донора. Однако, в случае возникновения необходимости использования аутостволовых клеток в лечении ребенка, они используются в качестве приоритетного материала по заявке лицензированного лечебного учреждения, если они не были ранее использованы для другого реципиента. Любое коммерческое использование стволовых клеток, в том числе и выбракованных, не допускается. Допускается выбраковка стволовых клеток, если они не соответствуют требованиям стерильности, количества и жизнеспособности.
Изложенные положения мне понятны. Я соглашаюсь на сбор пуповинной крови после рождения моего ребенка. Мне понятны и я принимаю следующие условия:
1. Вся информация о доноре стволовых клеток является строго конфиденциальной, не подлежит разглашению, доступ к ней имеет только медицинский персонал с определенными полномочиями.
2. Одновременно со сбором пуповинной крови для проведения дополнительных серологических тестирований осуществляется забор венозной крови матери.
3. Для получения пуповинной крови используется только плацента в период ее отделения и после него, строго после отделения ребенка.
4. Стволовые клетки, выделенные из пуповинной крови, могут подлежать длительному хранению, использованию в лечебных и научно-исследовательских целях и выбраковке без получения дополнительного согласия донора.