Действующий
Отчет должен содержать достаточную информацию о методе испытаний и применяемом программном обеспечении.
- при оценке острой токсичности наноматериала при пероральном введении в организм животных - по ГОСТ 32296 (раздел 5) и ГОСТ 32644 (раздел 5), ингаляционном введении - по ГОСТ 32542 (4.4), нанесении на кожу - по ГОСТ 32373 (раздел 6);
- при оценке подострой (субхронической) токсичности наноматериала при пероральном введении в организм животных - по ГОСТ 32637 (раздел 5) и ГОСТ 32641 (раздел 5), ингаляционном введении - по ГОСТ 32636 (раздел) и ГОСТ 32643 (раздел 7), нанесении на кожу - по ГОСТ 32639 (раздел 6) и ГОСТ 32634 (раздел 6);
- при оценке хронической токсичности наноматериала при пероральном введении в организм животных - по ГОСТ 32519 (раздел 5), ингаляционном введении - по ГОСТ 32383 (раздел 5), нанесении на кожу - по ГОСТ 32437 (раздел 5);
- при оценке репродуктивной токсичности наноматериала в одном поколении животных - по ГОСТ 32378 (раздел 6), ГОСТ 32379 (раздел 7); в двух поколениях животных - по ГОСТ Р 56698 (8.3);
При оценке воздействия наноматериала на организм в доклинических исследованиях безопасности лекарственных препаратов требования к отчету должны быть установлены в стандарте/методике на конкретный метод испытания.
7.3.1 Результаты испытаний оценивают по наблюдаемым эффектам и данным, полученным при анализе биологического материала. Оценку численных результатов испытаний, включая достоверность различия показателей жизнедеятельности животных в опытных и контрольных группах, выполняют с применением соответствующих статистических методов.
7.3.2 Эффект (воздействие) наноматериала на изучаемый показатель жизнедеятельности животного рассматривают как специфический, если:
- эффект статистически достоверно проявляется при воздействии наноматериала на организм животного, при отсутствии воздействия носителя, макроматериала или аналогичного материала;
- эффект статистически достоверно проявляется при сравнении групп животных, получавших в одинаковых количествах наноматериал или носитель наноматериала;
- эффект статистически достоверно проявляется при сравнении групп животных, получавших в одинаковых количествах наноматериал и макроматериал (или аналогичный материал).
7.3.3 Эффект (воздействие) наноматериала на изучаемый показатель жизнедеятельности животного рассматривают как дозозависимый, если достоверно установлена зависимость выраженности эффекта от величины дозы наноматериала.
Перечень
показателей, контролируемых при проведении испытаний по оценке подострой (субхронической) и хронической токсичности наноматериала
Показатели, контролируемые при проведении испытаний по оценке подострой (субхронической) и хронической токсичности наноматериала, подразделяют на интегральные, гематологические, цитологические, биохимические и микробиологические показатели.
Показатели, контролируемые при проведении испытаний по оценке подострой (субхронической) и хронической токсичности наноматериала, представлены в таблице А.1.
Таблица А.1 - Показатели, контролируемые при проведении испытаний по оценке подострой (субхронической) и хронической токсичности наноматериала
Показатель | Биоматериал | Периодичность контроля |
| Интегральные показатели | ||
| Общее состояние животных (внешний вид, поведение, двигательная активность, состояние шерстного покрова, характер стула) | Животное в целом | Прижизненно 1 раз в сутки |
| Поедаемость корма | Корм (не потребленные остатки) | Прижизненно 1 раз в сутки |
| Масса тела | Животное в целом | Прижизненно 1 раз в 7 суток |
| Объем суточной мочи | Моча | Прижизненно 1 раз в 30 суток |
| Абсолютная и относительная масса внутренних органов (минимальный перечень органов в соответствии с требованиями стандарта/методики на конкретный метод испытания) | Цельные органы | 1 раз при выведении из исследования после удаления соединительнотканных капсул и жира |
| Гематологические показатели | ||
| Концентрация гемоглобина в крови | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Гематокрит | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Общее количество эритроцитов | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Средний объем эритроцита | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Среднее содержание гемоглобина в эритроците | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Средняя концентрация гемоглобина в эритроците | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Общее число лейкоцитов | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Лейкоцитарная формула (относительное содержание от общего числа лейкоцитов, в процентах): базофилы, нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Скорость оседания эритроцитов | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Общее число тромбоцитов | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Цитологические показатели | ||
| Апоптоз клеток печени и головного мозга | Ткани печени и головного мозга | 1 раз при выведении из исследования |
| Стабильность мембран лизосом клеток печени | Ткань печени | 1 раз при выведении из исследования |
| Биохимические показатели | ||
| Общий анализ мочи (цвет, прозрачность, относительная плотность, рН, белок, глюкоза, креатинин) | Моча | Прижизненно 1 раз в 30 суток |
| Биохимический анализ крови (содержание общего белка, альбумина, глобулинов, глюкозы, креатинина, мочевины, желчных кислот, билирубина общего и прямого, натрия, калия, фосфора, хлоридов, активность аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, альфа-амилазы, липазы, лактатдегидрогеназы, холинэстеразы) | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Показатели системы 1 и 2 фазы метаболизма ксенобиотиков (общее содержание цитохромов Р-450 и b5, N-деметилирование амидопирина, О-деметилирование р-нитроанизола, гидроксилирование 3,4 бенз(а)пирена, О-деэтилирование 7-этоксикумарина, О-деэтилирование 7-этоксирезоруфина, О-деэтилирование 7-пентоксирезоруфина, эпоксидгидролаза, UDP-глюкуронозилтрансфераза, глутатионтрансфераза) | Ткань печени, микросомальная фракция | 1 раз при выведении из исследования |
| Активность ферментов антиоксидантной защиты (глутатионредуктаза, глутатионпероксидаза, супероксиддисмутаза, каталаза) | Эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание продуктов перекисного окисления липидов: малонового диальдегида, диеновых конъюгатов полиненасыщенных жирных кислот | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание небелковых тиолов (в пересчете на восстановленный глутатион) | Ткань печени | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание цинка | Сыворотка крови, бедренная кость | 1 раз при выведении из исследования |
| Активность щелочной фосфатазы | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание железа | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Ненасыщенная железосвязывающая способность | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Общая железосвязывающая способность | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Степень насыщения трансферрина | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание трансферрина | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание ферритина | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Содержание селена | Сыворотка крови, моча | 1 раз при выведении из исследования |
| Активность глутатионпероксидазы | Эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| Общие липиды | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Холестерин | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Холестерин ЛПВП | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Холестерин ЛПНП | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Триглицериды | Плазма крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Жирнокислотный состав сыворотки крови и мембран эритроцитов | Сыворотка крови, мембраны эритроцитов | 1 раз при выведении из исследования |
| Витамин А | Сыворотка крови, ткань печени | 1 раз при выведении из исследования |
| Витамин Е | Сыворотка крови, эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| Витамин В1 (тиамин) | Моча | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Транскетолаза эритроцитов и ТДФ-эффект | Эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| Витамин В2 | Моча | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Глутатионредуктаза эритроцитов и ФАД-эффект | Эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| 4-пиридоксиновая кислота | Моча | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Аспартатаминотрансфераза эритроцитов и ПАЛФ-эффект | Эритроциты | 1 раз при выведении из исследования |
| N1-метилникотинамид | Моча | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Никотинамидные коферменты (НАД и НАДФ) | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| 8-оксо-2-дезоксигуанозин | Моча | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
Цитокины (TNF- , IL1 , IL1 , IL2, IL3, IL4, IL5, IL6, IL8, IL10, IL13, IFN- ) | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
Хемокины (TGF- , IGF, G-CSF, VEGF, лептин) | Сыворотка крови | 1 раз при выведении из исследования |
| Клеточные маркеры лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD45RA, CD161a) | Цельная кровь | 1 раз при выведении из исследования |
| Фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов | Лейкоциты | 1 раз при выведении из исследования |
| Активность лактатдегидрогеназы | Бронхоальвеолярная лаважная жидкость | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
Активность  -глутамилтранспептидазы | Бронхоальвеолярная лаважная жидкость | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Активность щелочной фосфатазы | Бронхоальвеолярная лаважная жидкость | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Содержание общего белка | Бронхоальвеолярная лаважная жидкость | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Уровень фактора KL6 | Бронхоальвеолярная лаважная жидкость | Прижизненно на 30, 60 и 180 сутки |
| Микробиологические показатели | ||
| Бифидобактерии (Bifidobacterium spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Лактобациллы (Lactobacillus spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Энтеробактерии (Enterobacteriaceae spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Стафилококки (Staphylococcus spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Стрептококки (Streptococcus spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Энтерококки (Enterococcus spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Бактероиды (Bacteroides spp) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Мезофильные анаэробные микроорганизмы | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Гемолитические стрептококки | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Сульфитредуцирующие клостридии | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Золотистый стафилококк (S. aureus) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Протеи (Proteusspp.) | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
| Плесени, дрожжи | Содержимое слепой кишки | 1 раз при выведении из исследования |
[1] | СанПиН 2.1.4.1074-01 | Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества" |
[2] | MP 1.2.2641-10 | Методические рекомендации "Определение приоритетных видов наноматериалов в объектах окружающей среды, пищевых продуктах и живых организмах" |
[3] | СП 1.3.2322-08 | Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней" |
[4] | МУ 1.2.2520-09 | Методические указания "Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов" |
[5] | MP 4.2.0014-10 | Методические рекомендации "Методы контроля. Биологические факторы. Оценка генотоксических свойств методом ДНК-комет in vitro" |
[6] | MP 1.2.0052-11 | Методические рекомендации "Оценка воздействия наноматериалов на функцию иммунитета" |