где ОП_к - среднее значение ОП, измеренной в лунках с нулевым стандартом (экстрактом градуировочного раствора К₁ (см. 8.2.5);

ОП_п - среднее значение ОП, измеренной в лунках с экстрактами градуировочных растворов К₂-К₅ (см. 8.2.5) и с растворами экстрактов анализируемых проб.

По значениям процентов связывания, вычисленным для градуировочных растворов с соответствующими известными значениями массовой концентрации СЕМ, мкг/дм³, строят градуировочный график в полулогарифмической системе координат.

10.2 Для построения градуировочного графика используют масштабно-координатную бумагу. На ось абсцисс наносят значения логарифмов концентраций СЕМ в градуировочных растворах К₂-К₅ (см. 8.2.5). По оси ординат откладывают значения процентов связывания, рассчитанные для массовых концентраций по формуле (1). Градуировочный график строят с использованием кусочно-линейной зависимости.

10.3 С помощью градуировочного графика по значению процента связывания, полученного для растворов экстрактов анализируемых проб, находят логарифмы массовой концентрации в них СЕМ. С помощью калькулятора вычисляют его обратное значение (антилогарифм), соответствующее массовой концентрации СЕМ в растворе экстракта.

10.4 Массовую концентрацию (содержание) СЕМ в анализируемой пробе С, мкг/кг, рассчитывают по формуле

где с - массовая концентрация СЕМ в рабочем растворе экстракта анализируемой пробы, определяемая по градуировочному графику, мкг/дм³;

K - коэффициент пересчета мкг/дм³ в мкг/кг в экстракте анализируемой пробы, учитывающий ее разведение (для сухого молока равен 10, для остальных проб - единице).

За окончательный результат принимают среднеарифметическое двух измерений, выполненных в условиях повторяемости, если выполняется условие приемлемости

где С₁ и С₂ - результаты определений массовой концентрации СЕМ, полученные в условиях повторяемости, мкг/кг;

С_ср - среднеарифметическое значение результатов двух определений массовой концентрации СЕМ в анализируемой пробе, мкг/кг;

r_отн - предел повторяемости, %, приведенный в таблице 1.

Результаты измерений массовой концентрации СЕМ, мкг/кг, округляют до первого знака после запятой.

10.5 Допускается использование программного обеспечения, позволяющего определять массовую концентрацию (содержание) СЕМ в анализируемой пробе по средним значениям ОП, измеренным в лунках с экстрактами градуировочных растворов и анализируемых проб.

С помощью компьютерной системы обработки данных строят градуировочную зависимость ОП раствора от массовой концентрации СЕМ и аппроксимируют линейной функцией y = ax + b.

Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное программным обеспечением значение коэффициента корреляции r²   0,98.

За результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости

где C₁, С₂ - результаты параллельных определений массовой концентрации СЕМ, мкг/дм³;

r - значение предела повторяемости для разных диапазонов измерения (см. таблицу 1).

Результат определения массовой концентрации (содержания) СЕМ в анализируемой пробе представляют в виде

где С - массовая концентрация (содержание) СЕМ в анализируемой пробе, мкг/кг;

U - значение относительной расширенной неопределенности при коэффициенте охвата k = 2, % (см. таблицу 1).

11 Контроль точности результатов измерения

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости) и воспроизводимости, проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6 (раздел 5).

12 Контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости с применением карт Шухарта

Контроль стабильности результатов измерений при реализации метода в лаборатории осуществляют по ГОСТ ИСО 5725-6, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости рутинного анализа (раздел 6).

Комплектация тест-системы "Фурацилин - ИФА"*

──────────────────────────────

* Данный комплект реагентов является рекомендуемым и приведен для удобства пользователей настоящего стандарта.

В комплектацию тест-системы входят:

планшет 96-луночный полистироловый стрипованный для иммунологических исследований, с иммобилизованными антителами;

пакет полиэтиленовый фольгированный с зип-локом;

пленка полиэтиленовая самоклеящаяся для заклеивания планшетов;

Растворы:

N 1 - СЕМ - раствор массовой концентрацией СЕМ 6,25 мкг/см³;

N 2 - ФК - конъюгат СЕМ с пероксидазой хрена;

N 3 - раствор фосфатного буфера для промывки (20-кратный концентрат), рН (7,0-7,4) ед. рН;

N 4 - реакционный буферный раствор с добавлением бычьего сывороточного альбумина, рН 7,0-7,4 ед. рН, стерильный;

N 5 - раствор субстрата на основе ТМБ с добавлением перекиси водорода;