При анализе драже или таблеток взвешивают 30-50 шт. и определяют массу одной штуки, как среднее арифметическое. Отобранную пробу тщательно растирают в ступке и из растертой массы берут на аналитических весах две параллельные навески, около 1 г каждая. Навески количественно переносят в мерные колбы вместимостью на 100 , растворяют в воде и доводят раствор до метки; при наличии мути раствор фильтруют.

Из полученных основных растворов (кристаллического препарата, драже или таблеток) приготовляют путем дополнительного разведения рабочие растворы с таким расчетом, чтобы в растворе, поступающем на окисление, содержалось от 1 до 2 витамина в 1 . Из полученных растворов отбирают три пробы по 1 в делительные или капельные воронки или в цилиндры с притертыми пробками, туда же добавляют по 4 дистиллированной воды и перемешивают. К двум пробам добавляют по 3 окислительной смеси, к третьей (контрольной) - 3 15%-ного раствора щелочи.

Пробы встряхивают, добавляют в каждую по 12 изобутилового, изоамилового или бутилового спирта и встряхивают 2 мин, после чего спиртовому и водному слою дают отстояться. Водную нижнюю фазу удаляют, а в спиртовую добавляют около 0,5 г сернокислого натрия или 2 этилового спирта и после перемешивания отбирают 10 в пробирки для определения флуоресценции. Окисленные растворы необходимо предохранять от яркого света и тотчас проводить измерение интенсивности флуоресценции.

Пробирки с испытуемыми растворами помещают перед светофильтром ртутно-кварцевой лампы и сравнивают интенсивность флуоресценции со шкалой стандартов: для этого одну из пробирок с испытуемым раствором помещают между двумя соседними пробирками со стандартными растворами, останавливаясь на той, которая по интенсивности флуоресценции совпадает с испытуемой. Если интенсивность флуоресценции окажется между интенсивностью флуоресценции соседних стандартных пробирок, то берется средняя величина.

Аналогично поступают с растворами контрольного опыта (пробирки с раствором без окислителя).

Содержание (чистота) витамина в кристаллических препаратах (X) в процентах вычисляют по формуле

где С - количество витамина в 1 , стандартного раствора в , флуоресценция которого совпадает с флуоресценцией испытуемого раствора;

- количество витамина в 1 стандартного раствора в , флуоресценция которого совпадает с флуоресценцией контрольного опыта;

m - навеска, г;.

V - объем, в котором растворена навеска, ;

- объем, взятый для приготовления рабочего раствора, ;

- конечный объем рабочего раствора, ;

- объем рабочего раствора, взятый па окисление, ;

100 - пересчет на проценты.

Содержание витамина на одну штуку драже или таблеток (X), мг, вычисляют по формуле

где р - средняя масса одной штуки драже или таблеток, г;

1000 - коэффициент пересчета, мг.

(Остальные обозначения см. выше).

Точность метода .

Примечание. В случае анализа препаратов с тиаминбромидом-гидробромидом необходимо ввести коэффициент 1,29, умножая на него полученный результат.

27. Применяемые реактивы

а) Рибофлавин кристаллический.

б) Стандартный раствор рибофлавина (А): 40 мг кристаллического рибофлавина растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 при нагревании (или 10 мг на 250 ), по охлаждении раствор доводят до метки. 1 раствора содержит 40 рибофлавина. Раствор хранят в темноте на холоду не более 1 мес.

Перед анализом приготовляют рабочий раствор (Б), для чего 20 раствора А помещают в мерную колбу вместимостью на 100 и доводят водой до метки.

B 1 раствора Б содержится 8 рибофлавина.

28. Необходимая аппаратура:

Колориметр типа Дюбоска или электрофотоколориметр.

29. Описание определения

Колориметрический метод определения в кристаллических препаратах, драже и таблетках

При анализе кристаллических препаратов берут навеску препарата в количестве 40 мг на 1 (или 10 мг на 250 ) дистиллированной воды и растворяют так, как указано при приготовлении стандартных растворов.

При анализе драже или таблеток взвешивают 30-50 шт. и определяют массу одной штуки, как среднее арифметическое. Отобранную пробу тщательно растирают в ступке и из растертой массы берут на аналитических весах 2 параллельные навески, около 1 г каждая. Навески растворяют в дистиллированной воде в мерных колбах вместимостью 100 или 250 (в зависимости от предполагаемого содержания витамина ) с таким расчетом, чтобы в 1 раствора содержалось около 8 витамина . Растворы доводят до метки водой, фильтруют и интенсивность окраски измеряют в колориметре типа Дюбоска, сравнивая со стандартным раствором витамина , или в электрофотоколориметре.

При использовании электрофотоколориметра применяют светофильтр 470 и составляют калибровочную кривую по стандартному раствору, разведенному дистиллированной водой до различных концентраций по принципу, изложенному в разделе II (1 ( , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 и 8 в 1 ).

Содержание (чистота) витамина в кристаллических препаратах (X) в процентах вычисляют по формуле:

При использовании колориметра типа Дюбоска

где С - количество витамина в 1 стандартного раствора, ;

- высота столба стандартного раствора, мм;

- высота столба испытуемого раствора, мм;

m - навеска, г;

V - объем раствора, в котором растворена навеска, ;

100 - пересчет на проценты.

При использовании электрофотоколориметра

где n - содержаний рибофлавина, , найденное по калибровочной кривой для испытуемого раствора. (Остальные обозначения см. выше).

Содержание витамина на 1 шт. драже или таблеток (X), мг, вычисляют по формуле

При использовании колориметра типа Дюбоска