Действующий
Камера для хроматографирования: сосуд с плоским дном, закрывающийся пришлифованной крышкой, или эксикатор по ГОСТ 25336.
Колонка стеклянная хроматографическая для очистки экстрактов из продуктов, содержащих жир: узкая часть - длина (50±2) см, диаметр (1,7±0,3) см, широкая часть - длина (1,5±2) см, диаметр (2,5±0,2) см.
Гексан, ч., очищенный концентрированной серной кислотой, отмытый дистиллированной водой, высушенный кристаллическим едким кали и перегнанный с дефлегматором по НД [5].
Эталоны хлорорганических пестицидов: кельтана, ДДТ, ДДД, ДДЭ, ГХЦГ, альдрина, гептахлора гарантированной степени чистоты с содержанием основного вещества не менее 95%.
Допускается применение других средств измерений, аппаратуры и реактивов, характеристики которых не уступают характеристикам указанных выше средств измерений, аппаратуры и реактивов.
В стакан насыпают силикагель, заливают гексаном, перемешивают, гексан сливают. Промывку повторяют три раза. Промытый силикагель прокаливают при температуре 180 °С в течение 2 ч. Хранят в плотно закрытой стеклянной банке.
В коническую колбу помещают вату, заливают гексаном, выдерживают 15 мин. Операцию повторяют два раза. Очищенную вату сушат на воздухе под тягой. Хранят в закрытой стеклянной банке.
В нижнюю часть колонки помещают кусочек очищенной ваты, насыпают силикагель АСК на высоту (26,0±0,5) см, уплотняют постукиванием по колонке деревянной палочкой. Затем помещают силикагель, пропитанный серной кислотой в отношении 4:1 (по массе), на 3 см, далее насыпают безводный сульфат натрия слоем (1,0±0,5) см. Через колонку пропускают 30 см
гексана и отжимают резиновой грушей. Эффективность колонки проверяют, внося 5 см смеси хлорорганических пестицидов с заданной концентрацией (в пределах 0,1-0,2 мкг). Дают возможность раствору впитаться в колонку, а затем элюируют пестициды 50 см гексана со скоростью одна капля в секунду.
гексана и отжимают резиновой грушей. Эффективность колонки проверяют, внося 5 см смеси хлорорганических пестицидов с заданной концентрацией (в пределах 0,1-0,2 мкг). Дают возможность раствору впитаться в колонку, а затем элюируют пестициды 50 см гексана со скоростью одна капля в секунду.
Элюат с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют при температуре 40 °С. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 см гексана, колбу закрывают пробкой на шлифе. Стенки колбы ополаскивают растворителем и аликвотную часть раствора (5 мкдм ) вводят в хроматограф и проводят измерения. При определении не менее 90% от заданного количества пестицидов сорбент можно считать пригодным для работы, а колонку использовать для анализа. При поступлении новой партии силикагеля проверяют его эффективность, как описано выше в 4.3.3.
гексана, колбу закрывают пробкой на шлифе. Стенки колбы ополаскивают растворителем и аликвотную часть раствора (5 мкдм ) вводят в хроматограф и проводят измерения. При определении не менее 90% от заданного количества пестицидов сорбент можно считать пригодным для работы, а колонку использовать для анализа. При поступлении новой партии силикагеля проверяют его эффективность, как описано выше в 4.3.3.
Раствор 1. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 см дистиллированной воды, прибавляют 10 см аммиака и доводят объем до 100 см ацетоном. Раствор хранят в течение 3 дней в холодильнике.
дистиллированной воды, прибавляют 10 см аммиака и доводят объем до 100 см ацетоном. Раствор хранят в течение 3 дней в холодильнике.
Раствор 2. 0,25 г азотнокислого серебра помещают в мерную колбу вместимостью 100 см , приливают 2,5 см дистиллированной воды, 5 см 2-феноксиэтанола, доводят до метки ацетоном и добавляют 3 капли 30%-ного раствора пероксида водорода.
, приливают 2,5 см дистиллированной воды, 5 см 2-феноксиэтанола, доводят до метки ацетоном и добавляют 3 капли 30%-ного раствора пероксида водорода.
В хроматографическую камеру за 1 ч до начала хроматографирования заливают смесь подвижных растворителей для насыщения ее парами. Объем подвижного растворителя в камере должен находиться на высоте не более чем 0,5 см от уровня дна.
Для приготовления основного раствора любого пестицида 10 мг эталонного препарата растворяют гексаном в мерной колбе вместимостью 100 см и доводят гексаном до метки. Хранят основные растворы в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 мес.
и доводят гексаном до метки. Хранят основные растворы в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 мес.
Пластины "Силуфол" перед употреблением промывают. Для этого в хроматографическую камеру наливают систему растворителей ацетон-аммиак (1:1) на высоту 5-7 мм и помещают туда пластинки в вертикальном положении. После того, как линия фронта подвижного растворителя поднимется, не доходя 10 мм до верха пластинки, ее вынимают, высушивают на воздухе, затем активируют в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 30-60 мин. Перед употреблением с вертикальных сторон пластинки удаляют слой в 3 мм, что способствует выравниванию фронта растворителя.
4.4.1 Из объединенной пробы продукта отбирают навеску массой 50,0 г, помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 см и заливают 100 см этилацетата. Содержимое колбы перемешивают в течение 20 мин на аппарате для встряхивания.
и заливают 100 см этилацетата. Содержимое колбы перемешивают в течение 20 мин на аппарате для встряхивания.
Экстракт декантируют в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сернокислого натрия. Эту операцию повторяют еще 2 раза. Экстракт объединяют и концентрируют с помощью ротационного испарителя досуха при температуре водяной бани 40-45 °С.
Сухой остаток количественно переносят с помощью 5 см гексана в делительную воронку вместимостью 100 см , добавляют 5 см концентрированной серной кислоты и содержимое воронки осторожно встряхивают 5-10 раз. После разделения слоев нижний слой сливают и отбрасывают. Очистку экстракта повторяют еще несколько раз. Очищенный экстракт промывают дважды раствором бикарбоната натрия с массовой долей 1% порциями по 5 см , а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод. Гексановый раствор количественно переносят в колбу грушевидной формы вместимостью 25 см и отгоняют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40-45 °С.
гексана в делительную воронку вместимостью 100 см , добавляют 5 см концентрированной серной кислоты и содержимое воронки осторожно встряхивают 5-10 раз. После разделения слоев нижний слой сливают и отбрасывают. Очистку экстракта повторяют еще несколько раз. Очищенный экстракт промывают дважды раствором бикарбоната натрия с массовой долей 1% порциями по 5 см , а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод. Гексановый раствор количественно переносят в колбу грушевидной формы вместимостью 25 см и отгоняют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40-45 °С.
4.4.3 Если анализируют объекты, содержащие жир, то полученный по 4.4.2 экстракт подвергают дополнительной очистке на колонке. Сухой остаток растворяют в 10 см гексана, переносят на колонку, подготовленную по 4.3.3, и элюируют пестициды с помощью 110 см смеси бензола с гексаном в соотношении 4:7 со скоростью одна капля в секунду. Элюат обезвоживают, пропуская через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют растворитель досуха.
гексана, переносят на колонку, подготовленную по 4.3.3, и элюируют пестициды с помощью 110 см смеси бензола с гексаном в соотношении 4:7 со скоростью одна капля в секунду. Элюат обезвоживают, пропуская через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют растворитель досуха.
4.4.4 Для очистки экстракта от восков сухой остаток, полученный по 4.4.1, растворяют охлажденной смесью ацетона и воды в соотношении 2:1 и выдерживают 30 мин в холодильнике. Воски отфильтровывают через бумажный фильтр, который промывают охлажденной смесью ацетона и воды 2:1. Пестициды экстрагируют из водно-ацетонового раствора гексаном. Растворитель упаривают.
4.4.5 Сухой очищенный остаток растворяют в колбе, внося пипеткой 1 см гексана. 0,1 см полученного раствора наносят микропипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку на линию старта, находящуюся от края на расстоянии 1,0 см. Для увеличения чувствительности метода сухой остаток растворяют в нескольких каплях гексана и полностью наносят на пластинку. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицидов, содержащие 1, 2, 4, 5, 10 мкг препарата.
гексана. 0,1 см полученного раствора наносят микропипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку на линию старта, находящуюся от края на расстоянии 1,0 см. Для увеличения чувствительности метода сухой остаток растворяют в нескольких каплях гексана и полностью наносят на пластинку. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицидов, содержащие 1, 2, 4, 5, 10 мкг препарата.
После нанесения пробы на пластинку "Силуфол" ее помещают в хроматографическую камеру с подвижным растворителем (N 1) - гексан-ацетон (6:1) или (N 2) - гексан (таблица 1). После того, как фронт растворителя поднимется по пластинке, ее вынимают из камеры, обрабатывают проявляющим реактивом и подвергают УФ-облучению в течение 5-10 мин лампой типа ПРК-4. Пластины располагают на расстоянии 20 см от источника света.